二維液相色譜(2DLC)就是將分離機理不同但又相互獨立的兩支色譜柱串聯(lián)起來構(gòu)成的分離系統(tǒng)。樣品首先經(jīng)過di一維的色譜柱進入接口，通過濃縮、富集或切割后被切換進入到第二維色譜柱和檢測器。

　　二維分離采用兩種不同的分離機理分離樣品，即利用樣品的兩種不同特性把復雜混合物分離成單一組分，這些特性包括極性差別、分子量、基團差別、空間構(gòu)形、酸堿性等，將具有不同分離效果的色譜分離模式進行組合，使復雜體系的樣品在一維系統(tǒng)中不能*分離的組分可能在二維系統(tǒng)中得到更好的分離，與一維系統(tǒng)相比，分辨率和分離能力都能得到很大的提高。

　　根據(jù)di一維餾分是否直接轉(zhuǎn)移到第二維，可把二維色譜分為離線(off-line)和在線(on-1ine)兩種模式，離線模式對儀器的要求相對低，但是操作起來耗時耗力，難以實現(xiàn)自動化和重復性，并且在樣品處理過程中由于人為操作容易產(chǎn)生樣品的損失和污染。在線模式操作快，重復性好，可以避免人為誤差，提高樣品分析速率，具有更高的分離效率，但是對儀器設(shè)備的要求較高。

　　按照di一維的餾分是否全部進入第二維，又可將其分為中心切割(heartcutting)二維液相色譜和全二維(comprehensive)液相色譜，前者是將di一維色譜柱分離出的某個或者某些目標組分轉(zhuǎn)移到第二維進行繼續(xù)分析，適合目標組分的分析；后者是將di一維的餾分全部進入到第二維進行分離，主要通過在線二維液相色譜來實現(xiàn)。

　　基于不同的分離目的，可以采用不同分離機理來構(gòu)建二維液相色譜分離系統(tǒng)，例如，反相色譜(RPLC)、正相色譜(NP)、離子交換色譜(IEX)、親和色譜(AC)、尺寸排阻色譜(sEc)等分離模式。

　　我們常用反相色譜與正相色譜，而親水色譜(HILIC)是被認為是正相色譜(NP)的替代選擇，HILIC模式使用的梯度和反相模式相反。初始條件包括高比例有機相，典型的濃度是95%有機相如乙腈或甲醇，然后逐步降低到水相。